Dalam percobaan reaksi rantai polimerase (PCR), pengemasan reagen dan sampel secara langsung berdampak pada akurasi dan keamanan hasil eksperimen. Prosedur pengemasan PCR standar harus sepenuhnya mematuhi prinsip -prinsip sterilitas, pencegahan kontaminasi, dan pelabelan yang jelas. Prosedur spesifik diuraikan di bawah ini.
1. Persiapan
Sebelum melanjutkan, kenakan mantel lab, sarung tangan, dan topeng untuk memastikan lingkungan yang bersih (bangku bersih atau kabinet hayati disarankan). Periksa bahwa semua barang habis pakai (misalnya, tabung centrifuge, pelat PCR) bebas dari kontaminasi DNase/RNase dan menggunakan sterilisasi gratis atau enzim -. Reagen (misalnya, primer, template DNA, enzim, dll.) Harus dialikasikan menjadi botol individu untuk menghindari pembekuan berulang - siklus pencairan.
2. Alikuot dan pelabelan
Reagen Aliquoting: Gunakan pipet untuk mengeluarkan campuran master, primer, dll. Ke dalam tabung centrifuge atau sumur pelat PCR sesuai dengan kebutuhan eksperimental, secara akurat mengeluarkan setiap volume ke mikroliter terdekat. Gunakan tip pipet sekali pakai untuk menghindari kontaminasi silang -.
Standar Pelabelan: Semua wadah harus diberi label dengan jelas dengan nama, konsentrasi, tanggal, dan nomor operator. Label tahan air atau ukiran langsung disarankan untuk mencegah tanda yang tidak terbaca.
3. Kemasan dan penyegelan
Setelah alikuot, segera kencangkan tutup tabung centrifuge atau tutup pelat PCR (menggunakan panas - menyegel film atau film perekat khusus) untuk mencegah kebocoran. Untuk penyimpanan istilah long -, disarankan untuk menempatkan kemasan di dalam kantong tertutup dan menambahkan pengeringan (seperti manik -manik gel silika) untuk mempertahankan lingkungan yang kering.
4. Penyimpanan dan Transportasi
Setelah kemasan, reagen PCR harus disimpan secara terpisah di - 20 derajat (long - istilah) atau 4 derajat (jangka pendek) untuk menghindari fluktuasi suhu. Transportasi harus dilakukan dalam wadah terisolasi yang diisi dengan bahan bantalan untuk mencegah guncangan dan kebocoran. Untuk sampel biohazardous, kepatuhan dengan persyaratan kemasan hayati di bawah PBB 3373 atau peraturan yang relevan diperlukan.
Prosedur pengemasan PCR standar sangat penting untuk keandalan eksperimental. Kontrol aseptik yang ketat dan pelabelan yang jelas dapat secara efektif mengurangi risiko kontaminasi dan memastikan akurasi data.
